重组DNA技术的基本工具课件.pptx

xxx基因工程;为了棉花姓“中国”;为了棉花姓“中国”;2017年10月13日,农业部种子管理局副局长吴晓玲在回答媒体提问时表示,目前中国自主选育的转基因棉花品种市场份额占到95%以上,国外品种不到5%。;双链DNA;什么是基因工程？;抗虫棉的培育有哪些关键操作步骤？;思考：解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些分子工具呢？;01;自主学习：;来源;原核生物易受自然界外源DNA的入侵，但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原体的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中起到切割外源DNA、使之失效的作用，从而达到保护自身的目的。因为限制酶识别DNA的特定核苷酸序列，所以不会伤害到自身的遗传物质。;限制酶;;SmaI只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开;平末端平末端;练习使用EcoRI剪切目的基因;练习使用EcoRI剪切目的基因;要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？

如果把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割，会怎样？;基因的针线：DNA连接酶;;;判断以下说法是否正确：;复习：DNA复制;根据所学知识，完成以下填空：

①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶⑤RNA聚合酶;;关于下图所示黏性末端的叙述，正确的是;项目;质粒——基因工程中常用的基因载体（课本P72）;【反馈练习】;【反馈练习】;;3.1.2DNA的粗提取与鉴定;;3.DNA的鉴定;(三)以洋葱为实验材料的实验设计：;2.在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在40C冰箱中放置几分钟后，再取上清液。也可以直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1500r/min的转速下离心5min，再取上清液放入烧杯中。;3.在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液（体积分数为95%），静止2-3min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分；或者将溶液倒入塑料离心管中，在10000r/min的转速下离心5min，弃上清液，将管底的沉淀物（粗提取的DNA）晾干。

4.取两只20ml的试管，各加入2mol/lNaCl溶液5ml。将丝状物或沉淀物溶于其中一个试管的NaCl溶液中，然后，向两只试管中各加入4ml的二苯胺试剂，混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min。待试管冷却后，比较两只试管中颜色的变化。;5.DNA的析出与鉴定;思考.讨论：;思考.讨论：;其他粗提取方法