裙带菜硫酸多糖的制备及其性质研究.pdf

l毽In 第三届尊洋生物高技术论坛 2005．08．19-23 裙带菜硫酸多糖的制备及其性质研究+ 门晓媛王一飞’康琰琰朱艳梅朱良 (暨南大学药学院生物医药研究开发基地广州 510632) 摘要：采用单因素实验，正交实验，结合极差、方差分析，多重比较，确定裙带菜硫酸多糖 制备的最佳工艺条件为：提取温度100℃，加水量80倍，提取时间4小时。按最佳提取条件， 采用乙醇分级沉淀法制得三个多糖样品，多糖含量平均为28．0％，硫酸基含量平均为10．8％， 蛋白含量平均为0．71％。红外光谱显示多糖样品有糖的特征峰，硫酸基特征峰且硫酸根连接 在糖的C2或C3处于平伏键位置、多糖样品为以B一糖苷键为主的吡喃糖． 关键词：裙带菜硫酸多糖 提取工艺理化性质 褐藻硫酸多糖(sulfated l i y n首次从褐藻掌状海带中提取出来。 称为褐藻糖胶、岩藻聚糖(Fucoidan)，1913年由K 它是一种杂多糖，除了含有岩藻糖和硫酸根外，还含有半乳糖、木糖、甘露糖和糖醛酸等。褐 藻硫酸多糖组成很复杂，在不同褐藻中变化很大，近年的研究表明：具有抗凝血、活血化瘀、 调节血脂、抗肿瘤、抗病毒、增强细胞免疫和体液免疫功能、抗衰老，对机体细胞的保护等 多种生物活性n～卯。 富，为开发利用褐藻硫酸多糖提供了有力的条件。本文以裙带菜为材料，对其制备工艺及部 分理化性质进行了研究，为今后的深入研究奠定了初步基础。 l试剂与仪器 浓硫酸，苯酚(分析纯重蒸馏试剂)，葡萄糖，无水乙醇等。以上试剂均为分析纯。 电热恒温水槽DK．8D型，上海森信实验仪器有限公司；台式冷冻离心机，德国产(D--78532 ALPHAI-2LD)； 32R)；精密PH计，PHS-3C；冷冻干燥机，德国产(CHRIST Tuttlingen，universal 721W微机型可见分光光度计，上海光学仪器五厂，数显自动旋光仪上海WZZ．ZA型， 核酸蛋白分析仪美国DU．640型等。 红外光谱仪德国EQUINOX55型， 2实验方法 2．1供试液的制备 取裙带菜干粉(0．59)，按不周条件提取，离心，取上清浓缩，加入无水乙醇，达75％v／v， +皋会项目： 南海海藻活性成分研究及I岛值化研究，广东省自然科学基金团队项目(粤科基办[2003]11．号) 植物配糖体抗RNA病毒活性成分的研究，广东省重点基金(013203) 。通讯作者： 一I三一飞，男，教授，博士生导师。．twangyf@jnu．edu．cnmenxiaoyuan@sina．com 280 覆毽ln‘ 第三屠毫洋生秘膏技木论坛 2005．08．19．23 4。C静置过夜，离心，取沉淀，冷冻干燥，即得粗硫酸多糖，称取一定量粗多糖，加水定容， 作为供试液。 2．2总糖含量的测定 R2=0．9986 (多糖浓度为横坐标，光密度值为纵坐标) 样品含量测定：吸取样品液1．0ml，按标准曲线同法操作，测光密度，以标准曲线计算多 糖含量。并按下式讣算多糖得的提取率。 X×8×稀释倍数 多糖提取率(％)=—— ×100×p 裙带菜样品的景 (式中x为在Y吸光度下根据同归方程计算所得的值，P为校正系数，以葡萄糖作标准曲线， p=0．9) O s 2．3硫酸基的Dd O g n法定量测定 R2=O．9987 (以硫酸基浓度为横坐标，光密度值为纵坐标) 样品含量测定：以1mOj／LHcl作溶剂配制适量浓度的样品液，封闭管在100"12加热 3h，冷却后吸取0．2ml进行分析，J列标准曲线操作，测光