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PCR技术微习题
【达标反馈】1.在()的温度范围内,DNA的双螺旋结构解开A.55-60℃ B.90-95℃ C.70-75℃ D.40-60℃2.关于DNA的复制,下列叙述正确的是()A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5’端延伸DNA链B.DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D.DNA的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸3.DNA分子复制时,解旋的两条链中()A仅一条作为复制模板B两条链作为模板并复制出两个不同的DNA分子C两条链作为模板并复制出两个相同的DNA分子D两条链作为模板,各自合成一条子链,然后两条母链重新结合为原来的双螺旋分子,两条新链结合成一个全新的DNA分子4.下列各项过程中,遵循“碱基互补配对原则”的有()①DNA复制 ②RNA复制 ③转录 ④翻译 ⑤逆转录A①②③④⑤ B①②③④ C①②③⑤ D①③④⑤5.利用PCR技术,把一个双链DNA分子当作第一代,经过3次循环,在第四代DNA分子中,有几条第一代脱氧核苷酸的长链?()A2 B4 C8 D166.假设PCR反应中,只有一个DNA的片段作为模板,请计算在30次循环后,反应物中大约有多少这样的DNA片段()A215 B230 C260 D2317.DNA的合成方向总是()延伸。A从DNA分子的左端向右端 B从DNA分子的右端向左端C从子链的5,端向3,端 D从子链的3,端向5,端
DNA分子经PCR反应循环一次后,新合成的那条子链的脱氧核苷酸的序列应与()A模板母链相同B非模板母链相同C两条模板母链相同D两条模板母链都不相同
【能力提升】1.RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示:
(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、________、________和引物A等。
(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃,其目的是__________。
(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要________个引物B。
(4)利用RT-PCR技术获取的目的基因______________(填“能”或“不能”)在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是______。【达标反馈】
答案:1-8 BCCAABCB解释:
蛋白质大多不能忍受60-80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。2、由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从引物的3’端即复制方向由3’端向5’端延伸;由于DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对原则,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是从子链5’端向3’端延伸。
DNA分子复制时,解旋的两条链都是模板,经过复制得到两个相同的DNA分子。
复制不管是DNA还是RNA都是碱基互补配对,转录、翻译、逆转录中都用到mRNA,而mRNA中有碱基,所以遵循碱基互补配对原则,所以选A。5、因为后面复制的DNA均是以第一代的DNA的长链为模版,不管复制几代,第一代的DNA长链总是存在,又因为一个DNA分子含来两条DNA长链(双链),所以为两条。6、DNA复制一次,DNA的数目增加一倍,所以复制n次之后的子代DNA分子数是2的n次方,所以选B。7、DNA半保留复制时,DNA的两条链都能作为模板,同时合成出两条新的互补链。DNA分子的两条链是反向平行的,一条链的走向为5′→3′,另一条链为3′→5′。耐高温的DNA聚合酶的催化子链的合成方向都是5′→3′,所以DNA复制的方向总是5′→3′,所以选C。8、新合成的子链的脱氧核苷酸序列与非模板母链完全一致,与模板链互补。【能力提升】
答案:
(1)RNA提取物 逆转录酶 (2)让逆转录酶变性失活、使mRNA-cDNA杂合双链解开 (3)2n-1
(4)能 增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度),便于检测
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