- 1、本文档共14页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
番茄的植物组培
生物科学一班
摘要
目的:传统西红柿中的番茄红素含量相当少,并且大量存在于西红柿籽周围的类脂物中,所以我们希望通过植物组培的方法获得高产量番茄红素的番茄。方法:先对番茄种子进行杀菌消毒,进行培育,再利用培养的幼苗选取外植体进行愈伤组织培养,发育成成熟植株。结果:得到了高产量番茄红素的番茄。结论:利用组织培养而成的番茄番茄红素的产量较传统种植多。
关键词:番茄红素 愈伤培养 激素配比 外植体培养
前言
番茄营养丰富,风味香郁,深受人们的喜爱,在世界各地被广泛种植,成为各国的主要蔬菜作物之一。由于它是典型的双子叶植物,具有自花授粉、染色体图谱较清楚、较易栽培等优点,成为生物学领域研究最多的模式植物之一。近年来发现番茄中的番茄红素和胡萝卜素具有抗氧化、治疗各种癌症等功能,因此其食用价值和经济价值备受关注。
试验主要仪器和试剂
仪器
烧杯(100ml 3个,用于放初步处理后的外植体;1L 1个,用作废液缸;250ml 3个,包好牛皮纸后灭菌,分别装酒精、升汞和无菌水)、电子天平、称量纸(若干)、钥匙(若干)、玻璃棒(一根)、量筒(100ml和10ml各1个),胶头滴管(1个)、高压灭菌锅、超净工作台、保鲜膜、酒精灯、记号笔(或标签纸)、培养皿、试管
试剂
75% 酒精、大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、铁盐母液、无菌水、0.1%HgCl2、蔗糖、琼脂、6-BA、NAA
实验方法
1培养基的选择
番茄汁 50mL 酵母抽提液 5g 肉膏 10g 乳糖 20g 葡萄糖 2g k2HPO4 2g
吐温80 1g 乙酸钠 5g 琼脂 15g 水加至1000mL pH6.8±0.2
2.MS培养基(1L)
大量元素 50ml 钙盐 50ml 微量元素 10ml 维生素 10ml 铁盐 5ml 糖 50g 肌醇 0.1g 琼脂 4.5g
注意: 1)要在前种物质全部溶解后才能加入后种物质。
2)加热过程中要不停地搅拌。
当半成品的溶液沸腾时立即从电炉上取下搪瓷杯,放在实验桌上,用玻璃棒沾取少量的液体滴在酸性ph试纸上,用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl调整液体的pH至5.6—5.8,最后在搪瓷杯中用蒸馏水定容至1L
培养基的分装
准备30支试管,分成两组,一组不添加任何激素,一组添加6-BA、NAA激素
4.番茄种子的处理
自来水冲洗种子20min;0.1%氯化汞的浸泡5~10min,依照种皮硬度而定,所以番茄种子我们只消毒5min;然后用无菌水冲洗4次;
接种
1)将所需物品放入超净工作台:三种实验材料、灭菌好的培养基、无菌水、培养皿、吸水纸、操作工具、空烧杯、75%酒精、0.1%升汞溶液、废液缸、刀片、酒精灯、打火机
2)进入接种室前,需要洗净手和手腕。进入超净工作台内需用75%酒精纱布擦拭手、手腕,再擦培养基瓶和超净工作台。
3)剪、镊消毒:接种前剪、镊应插入75%酒精瓶中,取出后置于酒精灯外焰上彻底灼烧,灼烧时应将剪口、镊口张开,烧至剪、镊上火焰熄灭为止,冷却后方可进行接种。 接种后仍需灼烧并插回75%酒精的磨口瓶待用。注意每次取出时剪口并拢,不可接触磨口瓶和其它器皿,并保持尖端向下。
4)种子接种:将处理好的种子无菌操作放进准备好的果酱瓶培养基中,一般放2~3颗
5)外植体的处理
1.选取番茄的茎尖。 再生能力强,其次是遗传稳定性好。 2.外植体的初处理。将外植体置于医用口缸内,用皂粉清洗干净附着在材料上的泥沙等杂质;并用自来水冲洗干净。 3.外植体的消毒灭菌。将初处理过的材料在无菌操作台上用75%酒精表面消毒10s,再用无菌水冲洗2—3次;然后再用10%次氯酸钙消毒10—15min(此步骤能有效杀灭真菌),再用无菌水冲洗2—3次;然后再用3‰升汞(Hgcl2)消毒10min(此步骤能有效钝化细菌),再用无菌水冲洗2—3次,洗净附着在材料上的药剂。 4.将消毒灭菌后的外植体置于灭过菌的滤纸上,吸干水分。 5.接种时,用剪刀去除外植体取材时的伤口部位,以尽力保障接种材料不带菌。
6)注意事项
① 操作人员的头、胳膊等不得进入台内
② 操作人员不得随意谈话、说笑,以免造成污染
③ 用酒精对双手消毒时,务必待酒精彻底挥发后再靠近酒精灯火焰,以免火焰伤
④ 台外人员走动要轻、动作要小
培养:
培养室的温度应控制在25~28℃,每日光照时间为10~12h,光照强度为1600~2000lx。 此外还要定期观察是否出现
您可能关注的文档
- 法务与律师的区别(真实经历)及法务尽职调查文件清单.doc
- 翻译的不可译性和可译性及翻译的原则.doc
- 反比例函数讲义及反思报告范文6篇.doc
- 反复结构的童话故事及反复记号D.C. D.S.等-基础乐理.doc
- 反光物证脱影照相方法及反恐安全教育.doc
- 反应粘结型高分子湿铺防水卷材及反应粘高分子防水卷材施工技术交底.doc
- 饭店餐饮各部门组织架构图及饭店会计科目及账务处理.doc
- 饭店市场营销及饭堂策划方案.doc
- 泛读教程3答案及泛函分析答案.doc
- 泛函分析讲义及泛函分析的应用.doc
- 新的一年工作展望.docx
- 医生年终个人工作的述职报告(3篇).docx
- 2023年消防设施操作员之消防设备中级技能考前冲刺练习题附答案详解.docx
- 2022-2023年环境影响评价工程师之环评技术导则与标准通关练习题包括详细解答.docx
- 2023年中级注册安全工程师之安全生产管理考前冲刺检测卷和答案.docx
- 2023年中级银行从业资格之中级银行管理考前冲刺测试卷提供答案解析.docx
- 2023年公共营养师之二级营养师通关模拟考试试卷附带答案.docx
- 证券分析师之发布证券研究报告业务考前冲刺模拟题库.docx
- 2022-2023年二级建造师之二建建设工程法规及相关知识综合提升测试卷附答案.docx
- 2023年二级建造师之二建机电工程实务通关模拟考试试卷提供答案解析.docx
文档评论(0)