- 1、本文档共30页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
生物校本教材(三)
生物校本教材(三)
共 64
共 64 页
第 PAGE 12页
高中生物基础知识总结
选修
选修 3《现代生物科技专题》知识点总结
专题 1
基因工程
一、基因工程的概念:
基因工程是指按照人们的愿望, 通过体外 DNA重组和转基因等技术, 赋予生物以新的遗传特性, 创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。又叫做 DNA重组技术
操作水平: DNA分子水平; 优点:①定向改造生物性状(与诱变育
种相比);②克服远缘杂交不亲和障碍(与杂交育种相比) 二、基因工程的基本工具
“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶,不能切割 RNA和单链 DNA)
)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
)功能:能够识别双链 DNA分子的某种特定的核苷酸序列 (含 4 到 8
个核苷酸的回纹序列),并且使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性
)结果:产生黏性末端或平末端。
“分子缝合针”—— DNA连接酶
分类: E·coli DNA连接酶(来源于大肠杆菌)和 T4- DNA连接酶(来源于 T4 噬菌体)
E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端;而 T4DNA连接酶能连接两种末端,但连接平末端的效率较低
与 DNA 聚合酶作用的异同 :DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加 到单链 DNA 片段的末端, 合成子链。DNA连接酶是连接两个 DNA片段
RNA聚合酶的作用部位: 磷酸二酯键和氢键; 解旋酶的作用部位:氢键
DNA 连接酶、 DNA聚合酶、限制酶、 DNA(水解)酶的作用部位:磷酸二酯键
“分子运输车”——载体
)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存
②具有一至多个限制酶切位点,便于目的基因
的插入
③具有标记基因,便于目的基因的鉴定和筛选
* 标记基因:合成荧光蛋白的基因或抗性基因(如抗青霉素基因)
)最常用的载体是质粒 , 是细胞质中一种裸露的小型环状 DNA,并具有自我复制能力
)其它载体:λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒
注意: 1. 目的基因 :主要是指编码蛋白质的基因,也可以是一些具有调控作用的因子
获得目的基因一般要切 2 个切口,产生 4 个黏性末端
一般用同种限制酶切割目的基因和质粒, 以获得相同的黏性末端,利于重组质粒的构建(但可能导致目的基因自身环化)
用两种限制酶同时切割目的基因和质粒, 可防止目的基因和质粒自身环化(还可以防止目的基因反向连接)
原核生物体内的限制酶不切割自身 DNA的原因:原核生物的DNA中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰
基因工程得以实现的理论基础:
①不同生物的 DNA分子结构基本相同; ②所有生物共用一套遗传密码
( 二) 基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的获取(三种方法)
1. 从基因文库中获取:
)分类:①基因组文库:含有某种生物的全部基因;② cDNA文库:含有某种生物的部分基因
)基因文库的构建过程:略(课本 P10;注意两种文库的区别) 2.PCR技术扩增目的基因
)概念:短时间内在体外大量复制 DNA的技术。
) 原理: DNA双链复制
)条件:模板、Taq 酶、引物(单链 DNA片段,能与模板链互补配对) 、 4 种脱氧核苷酸
)过程:变性 →退火→延伸
3. 通过 DNA合成仪用 化学方法人工合成 :目的基因比较小, 核苷酸序列已知
第二步:基因表达载体的构建(核心步骤)
目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在和表达, 并且可以遗传给下一代
组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因( +复制原点)
)启动子( RNA聚合酶结合位点) :位于基因的首端, 能驱动基因转录出 mRNA
)终止子:位于基因的尾端,终止转录
①启动子和终止子位于 DNA上;起始密码子和终止密码子位于 mRNA
上
②真核生物的基因结构
非编码区:不能转录出 mRNA但, 能调控基因的表达(含有
启动子和终止子)
基因 外显子:转录出的 mRNA能翻译出蛋白质 编码区 (原核生物的基因无外显子和内含子之分)
(能转录形成 mRN)A 内含子:转录出的 mRNA不能翻译出蛋白质
(加工时被剪切)
第三步:将目的基因导入受体细胞
转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程
常用的转化方法:
①导入植物细胞: 主要是农杆菌转化法 ,其次还有基因枪法和花粉管通道法等
农杆菌能感染双子叶植物和裸子植物(植物受损伤时,伤口处细胞分
泌大量酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞),农杆菌中 Ti 质粒的
T-DNA能转移至受体细胞,并整合到受体细胞染色体的 DNA上
②导入动物细胞:最常用的方法:显微注射技术。 受体细胞:受精
卵
③导入微生物细胞: 原核生物作为受体细胞的优点:繁殖快、多为单细胞、遗传
您可能关注的文档
- 2022年高考生物总复习高中生物实验总结(人教版).docx
- 2022年高考生物总复习高中生物五大模块知识点精编汇总(完整版).docx
- 2022年高考生物总复习高中生物选修一核心知识填空复习.docx
- 2022年高考生物总复习高中生物学生实验归类(精华版).docx
- 2022年高考生物总复习沪科版生命科学实验总结(精华版).docx
- 2022年高考生物总复习基础概念复习提纲(选修三).docx
- 2022年高考生物总复习教材精读选修三知识梳理(学生版).docx
- 2022年高考生物总复习人教版必修2全册基础知识复习清单(精华版).docx
- 2022年高考生物总复习人教版高中生物必修二背书总结(全册).docx
- 2022年高考生物总复习生物老师总结的15张知识点图.docx
文档评论(0)