扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用.doc

扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用 目录 TOC \o "1-9" \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用 1 1 材料和方法 3 2 结果 5 3 讨论 6 文2：大黄素黄芪多糖在体外对乙型肝炎病毒的抑制作用 8 1 材料与方法 9 2 结果 12 3 讨论 13 参考文摘引言： 14 原创性声明（模板） 16 文章致谢（模板） 16 正文 扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用 文1：扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用 Abstract:ObjectiveTo study the inhibitory effect of Chinese medicine compound prescriptio Fuzheng Lishi Huoxue on duck hepatitis B virus (DHBV) in duck embryo liver Cells. MethodsThe duck embryo liver cells with congenital infection DHBV were incubated with different concentration extracts of Chinese medicine compound Fuzheng Lishi Huoxue, which was extracted with water and alcohol respectively. The level of DHBV DNA in culture supernatants was detected using FQ-PCR at different time points after the cell being inoculated. ResultsWater extract of Fuzheng Lishi Huoxue had no significant effect on supernantant DHBV DNA Content (P﹥), but alcohol extract of Fuzheng Lishi Huoxue supernatant DHBV DNA content (P<).ConclusionThe alcohol extract of Chinese medicine Compound Fuzheng Lishi Huoxue has direct inhibitory effect on duck hepatitis B virus (DHBV) in duck embryo liver cells. Key words:Compound Fuzheng Lishi Huoxue; Duck Hepatitis B virus (DHBV); Liver Cell; FQ-PCR 乙型病毒性肝炎是当今世界上3大顽症之一,全世界范围内大约有4亿乙型肝炎病毒(HBV) 感染者［1］，我国一般人群中HBsAg流行率为% ,估计约亿人为慢性HBV 感染,占全世界慢性HBV感染者的1/3［2］。乙型肝炎抗病毒 治疗 的目标是持续抑制HBV复制、清除病毒,阻止肝脏炎症和坏死的进展,使疾病获得痊愈［3］。由于HBV 复制的原始模板cccDNA 难以消除,加之患者存在不同程度对HBV 的免疫耐受, 使得目前的治疗药物要达到彻底清除病毒是非常困难的，如核苷类似物抗HBV 作用强而快,但疗程难以确定,长期治疗均可产生耐药突变,在治疗过程中会引起ALT和HBV DNA的突破,可使病情恶化［4］ 中医药具有抑制HBV复制、抗肝纤维化、改善肝功能、保护肝细胞等作用,在治疗乙型病毒性肝炎方面有独特的优势。中药复方是中医防治疾病的特殊手段，最能体现中医理论的精髓，是治疗乙型病毒性肝炎的有效手段。本研究基于乙型病毒性肝炎多为湿热疫毒侵袭、肝脾肾虚损、瘀血阻络，终致气血、阴阳紊乱，脏腑功能出现虚损性和失调性变化的病机特点，以扶正利湿活血为法，研究中药复方水提物和醇提物对先天感染的鸭胚肝细胞DHBV的抑制作用，以期初步探索中药扶正利湿活血复方治疗鸭慢性乙型肝炎的作用机制和靶点。 1 材料和方法 试剂和中药复方提取物制备 孵化22～25日龄的鸭胚，自市场上购买。Trizol，购自Invitrogen公司；LA TaqDNA 聚合酶、dNTP (A、T、C、G 4 种碱基, 25 mmol/ L)，分子量Marker均购自Ferments 公司；青霉素、链霉素为上海先锋药业公司产品；Williams E培养基、胶原蛋