埃博拉出血热病毒的样本采集运送和实验室检测讲课文档.pptVIP

第一页，共26页。 主要内容 标本采集 标本包装与运送 实验室检测 第二页，共26页。 （一）标本采集 第三页，共26页。 标本采集人员的防护 按照2014年8月19日发布的《中国疾病预防控制中心关于埃博拉出血热个人防护技术方案指南（第一版）（试行）》的要求，采样人员应穿戴防护用品包括: 一次性工作帽 一次性防渗漏防护服 防水靴（或者密闭式、防穿刺防水的鞋加穿一次性鞋套） 防护眼罩或防护面屏 医用防护口罩（N95及以上）或全面型自吸过滤式呼吸器 双层一次性乳胶手套 第四页，共26页。 标本采集人员的防护 穿戴顺序： 步骤1：手卫生 步骤2：一次性工作帽（如需要） 步骤3：医用防护口罩（N95及以上）或全面型自吸过滤式呼吸器 步骤4：防护眼罩或防护面屏，如选择全面型自吸过滤式呼吸器时无需佩戴 步骤5：里层一次性乳胶手套 步骤6：一次性防渗漏防护服（必要时，可加穿防水围裙） 步骤7：外层一次性乳胶手套 步骤8：防水靴或防水靴套（或者密闭式、防穿刺防水的鞋加穿一次性鞋套） 第五页，共26页。 标本采集人员的防护 脱摘顺序： 步骤1：外层一次性乳胶手套 步骤2：防水靴或防水靴套（或者密闭式、防穿刺防水的鞋加穿一次性鞋套） 步骤3：内层手套消毒 步骤4：一次性防渗漏防护服（需要时，先脱防水围裙） 步骤5：内层手套消毒 步骤6：防护眼罩或防护面屏 步骤7：医用防护口罩（N95及以上）或全面型自吸过滤式呼吸器 步骤8：一次性工作帽（如需要） 步骤9：里层一次性乳胶手套 步骤10：手卫生 第六页，共26页。 标本采集 按照《埃博拉出血热防控方案（第二版）》规定，定点医院负责病例的标本采集工作 根据流行病学史、症状等判别结果，采集留观病例、疑似病例和确诊病例的标本 目前仅需采集血液标本，大小便、唾液和组织也可用于检测 第七页，共26页。 标本采集 用分离胶无菌真空促凝管采集静脉血，每管3mL，标记后4℃保存，填写标本采集登记表 留观病例、疑似病例采集4管，其中2管尽快送省疾控中心实验室，2管保存于样本采集单位，待排除埃博拉病毒感染后用于其它病原体的筛查 第八页，共26页。 （二）标本包装与运送 第九页，共26页。 标本包装、运送 按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》要求运输至具有从事埃博拉病毒相关实验活动资质的实验室 标本应当置于符合国际民航组织规定的A类包装运输材料之中 低温冷藏运输，避免反复冻融 第十页，共26页。 标本包装、运送 A类包装，符合UN2814要求，按照三重包装系统包装：第一层包装（可密封样本袋、50mL离心管等）；第二层安全壳容器（防水、防漏）；外层运输包装组成 样本袋放入防水防漏的第二层安全壳容器中，为降低破碎或泄漏的风险，用吸水纸等填充物固定标本袋。安全壳容器和外包装之间放冰袋 不要打开采集管或分装样本 不要离心分离血清 第十一页，共26页。 标本包装、运送 第十二页，共26页。 （三）实验室检测 第十三页，共26页。 实验室检测的生物安全要求 实验室病原学和血清学检测相关活动严格按照《人间传染的病原微生物名录》的要求，在相应的生物安全级别实验室开展。 病毒培养在BSL-4实验室 动物感染实验在ABSL-4实验室 未经培养的感染材料的操作在BSL-3实验室 灭活材料的操作在BSL-2实验室 无感染性材料的操作在BSL-1实验室中进行 第十四页，共26页。 实验人员个人防护 口罩、帽子、防渗漏防护服、乳胶手套、高筒鞋套、防护面罩（正压头盔）等； 注：手套、防护服大小要合适，检查有无破漏；手套的量要充足，满足随时更换。 所有涉及感染性材料的操作均应在BSL-3实验室二级生物安全柜内进行； 方便取用的消毒剂（0.5%次氯酸钠溶液、75%酒精等），空间喷雾消毒设备（使用过氧乙酸，过氧化氢等）。 第十五页，共26页。 埃博拉出血热病毒实验室检测 实验室检测 （1）病毒抗原阳性 （2）血清特异性IgM抗体阳性 （3）恢复期血清特异性IgG抗体滴度比急性期有4倍以上升高 （4）从患者标本中检出埃博拉病毒RNA （5）从患者标本中分离到埃博拉病毒 诊断 疑似病例基础上具备诊断依据中实验室检查任一项检测阳性者 第十六页，共26页。 检测内容 目前省疾控中心实验室报送审批的检测项目包括： 埃博拉病毒核酸检测 抗埃博拉病毒IgM、IgG抗体检测 第十七页，共26页。 标本处理与保存 省疾控中心在BSL-3实验室尽快分离血清，离心时使用有密封盖的离心桶或转头进行标本离心，应在生物安全柜内打开离心转头放入或取出装有标本的离心管 分离的血清标本长期保存应置于-70℃以下，保存不超过1周可置-20℃ 第十八页，共26页。 实验操作的生物安全要求 核酸提取时，加入核酸提