aktafplc快速纯化液相色谱系统.doc

GE Healthcare Data File 18-1128-41 液相色谱系统 快速纯化液相色谱系统 快速简单的进行蛋白质纯化 ? 方法向导可帮您简单进行编程 ? 全面的分离柱库 ? 自动进行条件筛选以建立和优化纯化方法 ? 使用流行的分离介质，分离时间短 每一个运行过程都可信赖 ? 高灵敏度和可重复度 ? 高效组分收集 ? 自动对运行过程进行评估、报告 ? 简单，快速的用于规模扩大 灵活的用于任何一种纯化 ? 简单的系统调整 图1：?KTAFPLC 系统。 ? 适用于所有的色谱层析技术 ?KTAdesign 技术支持 简介 ?KTAFPLC? 是一款具有生物兼容性的高效液相色谱系 统，用于快速简单的对蛋白质进行分离纯化。独特的设 计使得系统结构紧凑，便于使用，同时还有一个可开合 的支架（图2）。直接系统可谓长色谱柱的使用，系统参 数的修改及增加自动化程度提供了内在的灵活性。 ?KTAFPLC? 系统由UNICORN程序控制，它是一个集控 制、评估和报告于一体的?KTA?design系统平台，可保证 系统与使用者之间快速简单的交流。UNICORN程序适用 于Windows 2000/XP操作系统，并且可通过网络对多个系 统进行控制。 ?KTAFPLC? 系统同蛋白质纯化中常用的所有溶液都有很 好的兼容性，包括疏水色谱层析中使用的高盐溶液。 图2：架式系统构造具备内在灵活性。 g df 18-1128-41 AF, 2004-12 ? p1 快速简单的纯化蛋白 5XQ 马上开始工作吧！ 6HOHFWPHWKRG 你可查看系统在运行过程中的实时状态 $FFHVVWRPDQXDO LQVWUXFWLRQV 通过运行数据或系统流路径，您可直接进行人工操作 每一个运行过程都 值得信赖 自动进行评估，并生成特定 的评估报告 图3： 通过UNICORN控制平台对蛋白进行快速简单的分离纯化。 df 18-1128-41 AF, 2004-12 ? p2 可灵活的用于任何蛋白质的纯化。 Clarified E. coli extract, enzyme (DAOCS) purification HiPrep? 16/10 Q XL 10 ml/min Buffer A: 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 2 mM DTT, 0.2 mM PMSF Buffer B: Buffer A + 1 M NaCl mAU mS/cm Cell culture supernatant, mouse IgG2a HiTrap? rProtein A, 1 ml 1 ml/min Binding buffer: 100 mM Na2 PO4 , pH 7.7 Elution buffer: 100 mM sodium citrate, pH 3.3 mAU pH 8 800 80 7 3 000 DAOCS activity 600 6 60 2 000 5 400 40 4 1 000 0 0 50 100 150 200 250 ml 20 0 200 0 0 10 20 30 40 ml 3 2 0 图4A： 利用阴离子交换层析，通过增加离子强度的分步洗脱对重 图4B： 通过pH洗脱对鼠IgG2a 进行亲和纯化。 组DAOCS酶进行分离纯化。 Clarified E. coli extract, enzyme (DAOCS) purification HiTrap HIC Test Kit 3 ml/min Buffer A: 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, pH 7.5 Buffer B: Buffer A + 2 M (NH4)2SO4 mAU mS/cm mAU Protein standards: chymotrypsinogen A ovalbumin albumin Superdex? 200 HR 10/30 0.5 ml/min Buffer: 50 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4 300 200 300 250 200 200 150 100 100 100 50 0 0 0 0 5 10 15 ml 0 10 20 30 ml 图4C： 利用疏水相互作用色谱层析，通过梯度洗脱对重组DAOCS 图4D： 利用排阻层析进行纯化。 酶进行分离介质筛选。 df 18-1128-41 AF, 2004-12 ? p3 快速简单的进行蛋白质分离纯化 Select technique ——方法向导可使您轻松编程 图5展示的是您可以多快的开始一个已经存在的方法， Select column 以及使用方法