培养基灭菌时间计算PPT课件.ppt

抗生素的抑制剂 抗生素 被抑制的产物 抑制剂 链霉素 去甲基链霉素 四环素 去甲基金霉素 头孢菌素C 利福霉素 甘露糖链霉素 链霉素 金霉素 金霉素 头孢霉素N 其他利福霉素 甘露聚糖 乙硫氨酸 溴化物、硫脲 硫胺化合物 L-蛋氨酸 巴比妥药物 * 第六节 培养基灭菌 重点：消毒与灭菌的区别；灭菌方法；加热灭菌的原理；影响培养基灭菌的其他因素；培养基灭菌时间计算；分批灭菌和连续灭菌比较； 难点：培养基灭菌时间计算； * 一、消毒与灭菌的区别： 所谓灭菌就是杀死一切微生物，包括微生物的营养体和芽孢。 消毒是指消灭一切致病微生物（病原体）。 二、消毒与灭菌在发酵工业中的应用 牛奶巴氏消毒法：80-95℃，10min 发酵培养基的灭菌:121℃,20min * 三、灭菌方法： 1、干热灭菌：灼烧灭菌；加热方式有电热、红外线加热等；相对与湿热灭菌，干热要求时间长，温度高（一般160℃，2hr） 1）火焰焚烧法：接种环、试管口等 2）干烤法：利用热空气灭菌 用法：160℃,2小时 特点：由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死。所以温度高、时间长。 * 2、湿热灭菌：蒸气释放热量，使微生物蛋白质变性。 特点：温度低、时间短、灭菌效果好 原因： 1) 菌体内含水量越高，则凝固温度越低； 2) 蒸汽冷凝会放出潜热； 3) 饱和水蒸汽穿透力强； 4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定 性，主要破坏氢键结构。 * 湿热灭菌优点： 1）蒸气来源易，低价无毒； 2）蒸气穿透力强灭菌彻底； 3）蒸气冷凝释放热量； 4）蒸气易输送，易调节，易管理。 湿热灭菌缺点： 1）设备费用高； 2）不能用于怕受潮的物料； * 3、射线灭菌法： 1）电离辐射：χ、γ、β射线 。 原理 ：引起水和其他物质的电离，产生游离基，破坏DNA，从而造成细胞损伤。 特点；穿透力强，无专一性，对所有生物均有杀伤作用。 适用：菌种诱变。 * 2）非电离辐射（紫外线） 方法：在波长265-266nm处，杀菌力最强。 原理： （1）作用于DNA ，使同链DNA相邻嘧啶间形成嘧啶二聚体，引起DNA结构变形，阻碍正常的碱基配对，从而造成菌的变异或死亡。（光复活酶可修复） （2）有氧时产生过氧化氢，强氧化杀菌。 适用：空气、水的消毒杀菌（紫外灯）。 特点：穿透力差。 * 4、化学药品灭菌 方法：浸泡、熏蒸、喷洒、擦拭等，常用化学药品： 1）表面消毒剂： （1）酚类： 石炭酸（苯酚），0.1%抑菌；1%杀菌 甲酚皂（甲酚+肥皂）：3-5%皮肤消毒 机理：作为表面活性剂，使膜损伤；蛋白质变性 P.C.（石炭酸系数）：为消毒剂杀菌效率的标准。 是在一定时间内（10min）被测试的药剂能杀死全部供试微生物的最高稀释度与达到同样效果的酚最高稀释度的比值。 * （2）醇类： 乙醇：70-75%杀菌效率最高 机理：具脱水作用，能穿透菌体进入蛋白质分子肽链间隙，使蛋白质变性或脱水沉淀，造成微生物死亡。 无水乙醇：表面蛋白凝固，保护膜，杀菌力差 甲醇可使眼睛失明，故不宜做消毒剂；其他醇因不溶于水，一般不用。 * （3）醛类： 甲醛： 机理：蛋白质烷化剂； 应用：福尔马林（40%）； 10%的甲醛熏蒸，用于空气灭菌。 （4）表面活性剂： 可降低表面张力效应的物质。 机理：使菌体细胞膜破损；使菌体蛋白质变性。 种类：洗必泰、新洁尔灭等 特点：快速、彻底、效率高 * 第一节 培养基的原材料 一、培养基的营养成分及用途 微生物的养料来源 光 光能自养 氢、硫、氨 自养菌 Ⅰ.能源 亚硝酸盐、亚铁盐 化能自养 碳水化合物等有机物 石油天然气和石油化工产品 异养菌 功能：生长、繁殖需要； * 碳酸气 淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等 石油、正构石蜡、天然气 醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品 功能：提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础； 豆饼或蚕蛹水解液、味精废液 Ⅲ.氮源 玉米浆、酒糟水等有机氮 尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐等无机氮、气态氮 功能：构成菌体、含氮代谢物； Ⅱ.碳源 * 磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐 Ⅳ.无机盐